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全集动画剧情延续第一季后，讲述的是小蜘蛛成名以后，被尼克费瑞招揽，加入了神盾局。对于各路大英雄来说小蜘蛛实在是渺小，于是招待他的是各种锻炼测试，务求让他成为终极-蜘蛛侠。虽然戏份更多的是同队的铁拳、白虎女、神力侠、新星，但是从第五集开始，托尼、浩克、雷神、金刚狼纷纷登场，真是热闹非凡。